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葡聚糖凝膠分離的技巧和使用心得

發布時間:2021-06-22瀏覽:423次

  葡聚糖凝膠指的是由一定平均相對分子質量的葡聚糖(dextran)和甘油基以醚橋形式相互交聯而成,具有立體網狀結構,應用面廣的一類凝膠,國外商品名為Sephadex。交聯度的大小,可通過控制交聯劑(一般為環氧氯丙烷)和葡聚糖的配比以及反應條件來控制。
  葡聚糖凝膠分離的技巧和使用心得:
 ?。?)流速不可太快,切切不可新急,所謂欲速則不達。
 ?。?)柱子盡可能長,SephadexLH20柱長的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優勢兵力,打擊敵人。
 ?。?)餾分一定要接的細,可1/10,或1/20個保留體積接成一餾分。
 ?。?)洗脫體積一般為2-3個保留體積,對特殊保留強的化合物,可洗脫5個保留體積。
 ?。?)鞣質成分死吸附嚴重,如不在乎填料者,可用SephadexLH20分鞣質。
 ?。?)SephadexLH20對黃酮類成分的分離效果,方法很成型,有大量文獻參考。
 ?。?)填料反復使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。
  SephadexLH-20是由葡聚糖G-25羥丙基化加工而成,屬于分子篩凝膠,尤其適用于天然產物在有機溶劑中的純化。例如:類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等,PharmadexLH-20同時適用于分子類別非常相似的物質的分離和工業規模的制備,既可用于初步純化步驟,也可用于終精制步驟,如非對映同分異構體的分離。

 

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